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电位滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量

文章作者:文琪生物发布时间:文章热度:

一、实验原理

根据氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极(或复合电极)插入被测液中构成电池,用碱液滴定,根据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点。

二、仪器与试剂

1、仪器  酸度计  磁力搅拌器   烧杯(250mL)  微量滴定管

2、试剂  pH=6.18标准缓冲溶液;20%中性甲醛溶液;0.05mol/L左右的NaOH标准溶液

三、实验操作方法

(1)样品处理

先根据实验四测出待测酱油的比重,然后吸取酱油5.00mL于100mL容量瓶中,加水定容。吸取定容液20.00mL于250mL烧杯中,加水60mL,放入磁力转子,开动磁力搅拌器使转速适当。用pH6.18的标准缓冲液校正好酸度计,然后将电极清洗干净,再插入到上述酱油液中,用NaOH标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2,记下消耗的NaOH溶液体积。

(2)氨基酸的滴定

在上述滴定至pH8.2的溶液中加入10.00mL的中性甲醛溶液,再用NaOH标准溶液滴定至pH9.2,记下消耗的NaOH溶液体积。

(3)空白滴定

吸取80mL蒸馏水于250mL的烧杯中,用NaOH标准溶液滴定至pH8.2,然后加入10.00mL中性甲醛溶液,再用NaOH标准溶液滴定至pH9.2,记下加入甲醛后消耗的NaOH溶液体积。

四、实验计算

式中:

V1——酱油稀释液在加入甲醛后滴定至pH9.2所用NaOH标准溶液的体积mL;

V2——空白滴定在加入甲醛后滴定至pH9.2所用NaOH标准溶液的体积mL

C ——NaOH标准溶液的浓度mol/L

M——吸取的酱油的质量g

0.014——氮的毫摩尔质量g/m mol

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